How to Use a Pasteur Pipette?

巴斯德吸管是一种简单但必不可少的实验室工具，用于转移少量液体。尽管其结构看似简单，但正确使用对于确保准确性、避免污染和维护安全至关重要。巴斯德吸管主要有两种类型：塑料（一次性）和玻璃（可重复使用）。每种类型都有不同的操作方法、优点和局限性。本指南重点介绍如何正确使用巴斯德吸管，并为塑料和玻璃两种类型提供详细说明。.

什么是巴斯德吸管？

A 巴斯德吸管 是一种简单且广泛使用的实验室工具，用于转移、分液或添加少量液体。它以法国科学家 路易斯·巴斯德, 的名字命名，反映了其在微生物学和科学研究中的历史用途。巴斯德吸管通常由一根细长的管子和一个可挤压的球囊或橡胶乳头组成。根据材料，可分为两种主要类型：

• 玻璃巴斯德吸管：可重复使用、耐热，适用于有机溶剂或灭菌过程
• 塑料巴斯德吸管（一次性）：通常由聚乙烯（PE）制成，使用方便，非常适合在生物和临床应用中防止交叉污染                                                               查看更多…

关键特性：

• 简单易用
• 适用于小体积液体处理（逐滴转移）
• 经济高效且用途广泛
• 提供无菌和非无菌两种规格

常见应用：

• 微生物学实验中的液体转移
• 细胞培养中的试剂添加
• 实验室操作中的化学品分液
• 临床和诊断实验室中的样品处理

需要注意的是，巴斯德吸管通常未经校准，因此不适用于精确的定量测量。.

使用巴斯德吸管的基本步骤

尽管巴斯德吸管使用简单，但正确的技术对于避免污染、误差和样品损失至关重要。以下是标准化操作流程：

步骤 1：准备吸管

根据您的应用选择合适的类型：

• 一次性塑料巴斯德吸管：从无菌包装中取出后可直接使用；避免接触吸头
• 玻璃巴斯德吸管：使用前安装橡胶球囊（乳头）；确保吸管清洁、完好，并在需要时进行灭菌

注意：对于无菌操作（如细胞培养），请使用无菌吸管。.

步骤 2：挤压球囊（排出空气）

在接触液体之前，轻轻挤压橡胶球囊以排出内部的空气。.

目的：

• 为吸取液体产生负压
• 提高控制性和一致性

步骤 3：吸取液体

将吸管吸头略微浸入液体中，然后缓慢释放巴斯德吸管球囊，将液体吸入吸管。.

关键点：

• 缓慢释放球囊以避免产生气泡
• 不要过度填充（通常不超过容量的 2/3）
• 保持吸管垂直以获得更好的控制

步骤 4：转移液体

小心地将吸管从源容器中取出，并移至目标容器。.

重要提示：

• 转移过程中保持吸管稳定
• 避免接触非目标表面以防止污染

步骤 5：分液

将吸管吸头置于目标区域上方，轻轻挤压球囊以释放液体。.

技巧：

• 控制压力以实现逐滴或连续分液
• 施加稍大压力以完全排出残留液体
• 使用逐滴分液以获得更好的精确度

如何使用一次性塑料巴斯德吸管

开始操作前，将一次性巴斯德吸管、液体样品和接收容器放置在清洁稳定的工作台面上。对于无菌操作（如细胞培养或临床检测），所有操作应在层流罩或生物安全柜内进行。.

步骤 1：正确取出吸管（避免污染）

首先，用 70–75% 的乙醇消毒双手或佩戴无菌手套。轻轻打开包装的一端，不要摇晃，因为突然的动作可能会引入污染物。.

让吸管自然滑出包装。仅握住吸管的上部，始终保持手指远离吸头。吸头必须悬空，不得接触任何表面，包括手套、工作台或容器。.

如果吸头被意外触碰，则该吸管应视为已污染，必须丢弃。.

步骤 2：挤压球囊（准备吸取）

垂直握住吸管。用拇指和食指，温和而稳定地挤压顶部的集成球囊，直至其完全压缩。.

此动作应平稳而非用力过猛，确保球囊内的所有空气都被排出。压缩后，保持压力，暂不释放球囊。.

正确压缩的球囊应呈扁平状，但仍保持弹性。如果球囊变形或出现折痕，则可能用力过度。.

步骤 3：将吸管插入液体（控制深度和稳定性）

保持球囊压缩状态，缓慢将吸管吸头移向液面。不要立即插入。相反，应在液面上方约 1 cm 处暂停，然后逐渐降低吸头。.

一旦吸头接触液体，继续略微降低，直至其浸入液面下约 1–3 mm。尽可能保持吸管垂直（接近 90° 角），并确保手部稳定。.

保持此位置约 1 秒钟，使液面稳定。如果观察到波纹或气泡，则说明动作过快，应更缓慢地重复操作。.

步骤 4：吸取液体（关键控制步骤）

吸头正确定位在液体中后，开始缓慢、逐渐地释放球囊上的压力。不要突然释放。相反，让其以受控且连续的方式膨胀。.

释放球囊时：

• 液体将开始进入吸管吸头
• 吸管内的液面将稳定上升
• 当接近所需体积时，进一步减缓释放速度。

整个吸液过程应持续约2–5秒。.

一旦液体达到移液管总容量的三分之一至三分之二处，即停止释放吸球。这可以防止溢出并提高控制精度。.

若出现以下任一情况，应弃去液体并重复操作：

• 移液管内出现可见气泡
• 液体流动不规则或中断
• 液体突然快速充满（表明释放速度过快）

步骤5：提起并转移液体（保持稳定）

完成吸液后，将移液管在液体中静置约1秒，以使液柱稳定。.

然后，小心地将移液管垂直提起离开液体，切勿倾斜。取出后，平稳地将手移向接收容器。.

转移过程中，保持相同角度，避免摇晃或突然动作，否则可能导致液体提前滴落或引入气泡。.

将移液管尖端置于目标区域上方约0.5–1厘米处，确保其不接触容器壁或液面。.

步骤6：分液（受控释放）

正确定位后，轻轻挤压吸球以释放液体。.

施加的压力大小决定分液行为：

• 轻压 → 液体逐滴释放（适用于精确添加）
• 中压 → 液体连续流出
• 重压 → 完全排出剩余液体

进行精确操作时，每滴之间间隔约0.5秒以保持控制。.

排出大部分液体后，稍加压力并保持约1秒，以确保任何残留液体被完全排出。.

步骤7：使用后处理（严格的一次性使用原则）

完成转移后，将移液管移出工作区，并立即弃置于适当的实验室废物容器中。.

一次性塑料巴斯德移液管严禁重复使用，即使其看起来干净。.

若移液管曾用于生物样本（如细胞、血液），则必须按照生物危害废物处理规定进行处置。.

如何使用玻璃巴斯德移液管

开始前，将玻璃巴斯德移液管、橡胶吸球及待处理液体放置在稳定且清洁的实验台上。在整个过程中，所有动作应平稳可控，避免振动或意外碰撞。.

步骤1：检查移液管并安装橡胶吸球（确保气密性）

拿起玻璃巴斯德移液管，从上到下进行目视检查。特别注意是否有细微裂纹、白色划痕或尖端缺口。然后用手指轻轻触摸尖端，确保没有锋利边缘或不规则之处。.

接着，将橡胶吸球与移液管开口端对齐。不要直接强行推入。而是轻轻旋转吸球的同时向下推，直至其完全覆盖移液管开口并感觉紧密贴合。.

安装后，进行简单的泄漏测试：
用手指堵住移液管尖端，然后轻轻挤压并释放吸球。.

• 若吸球保持压缩状态，则密封良好
• 若吸球迅速回弹，则存在漏气，必须重新安装吸球

步骤2：排出空气并准备吸液

用拇指和食指握住装有吸球的移液管。缓慢而稳定地挤压吸球，直至其完全压缩。.

在此阶段不要释放吸球。保持其处于压缩（塌陷）状态。.

此处的关键不是用力，而是在保持弹性的同时确保吸球内所有空气已被排出。若吸球感觉变形或失去回弹力，则说明用力过大。.

步骤 3：将吸管插入液体（控制深度和稳定性）

保持吸球压缩状态的同时，缓慢将移液管尖端移向液面。不要立即插入。在液面上方约1厘米处暂停，然后平稳地降低。.

一旦尖端接触液体，继续略微降低，直至浸入液面下约1–5毫米。尽可能保持移液管垂直（约90°），并确保手部稳定。.

保持此位置约1秒，使液面稳定。.
若观察到波纹或气泡，说明动作过快，应更缓慢地重复操作。.

步骤4：吸取液体（最关键步骤）

在移液管尖端正确浸入后，开始缓慢释放对吸球的压力。此释放必须逐渐且连续，不可突然。.

可按如下方式理解此过程：

• 第一秒：液体刚开始进入移液管
• 第二至第三秒：液体平稳上升
• 第四秒后：接近目标体积

在此步骤中，持续观察移液管内的液面。一旦液体达到所需水平（通常不超过移液管长度的三分之二），立即停止释放吸球。.

若出现以下任一情况，应重复操作：

• 移液管内出现可见气泡
• 液体上升不均匀或间歇性
• 液体突然向上冲（释放过快）

步骤5：从液体中取出并转移

完成吸液后，不要立即移动。将移液管静置约1秒，以使内部液体稳定。.

然后缓慢垂直提起移液管离开液体，避免任何倾斜。取出后，平稳地将手移向接收容器。在此移动过程中，保持相同角度以防止内部液体扰动。.

到达目标容器时，将移液管尖端置于液面或容器底部上方约0.5–1厘米处，不接触容器壁或液体。.

步骤6：释放液体（精确控制过程）

将移液管尖端定位在目标分液区域后，开始轻轻挤压橡胶吸球。.

不要一次性完全挤压；而是根据需要控制压力：

• 若需逐滴添加液体，施加轻压使液体逐滴形成并自然脱离
• 若需连续转移，略微增加压力使液体以细流形式流出
• 若需完全排空，在最后阶段增加压力以完全排出剩余液体

分液过程中，建议每滴之间暂停约0.5秒，以便更好地控制体积。.

一旦大部分液体被释放，保持压力约1秒，以确保移液管内任何残留液体被完全排出。.

步骤7：完成与安全处理

使用后，将移液管从工作区取出，并放置于指定清洁区域。.

在整个过程中，请遵守以下安全规则：

• 严禁用口吸取液体（务必使用橡胶吸球）
• 避免玻璃移液管与任何表面发生碰撞
• 如发现任何裂纹或损坏，请立即停止使用该移液管

步骤8：清洁程序（必须正确执行）

使用后，应尽快清洁移液管：

首先，从顶部向移液管内引入适量有机溶剂（如乙醇），使其流经整个管体以清除内部残留物。重复此操作2–3次。.

接着，将移液管浸入实验室洗涤剂溶液中。如有必要，使用细刷轻轻清洁内壁，去除蛋白质或颗粒残留物。.

然后，用去离子水或蒸馏水彻底冲洗至少3–5次，直至无泡沫或洗涤剂残留。.

最后，将移液管倒置自然晾干，或在低温烘箱中干燥。如需重复使用，可在使用前对移液管进行灭菌处理（例如高压灭菌）。.

应避免的常见错误

重复使用一次性移液管

一次性塑料巴斯德移液管仅供单次使用。重复使用易导致污染及实验结果不可靠。.

详细说明：

• 移液管内可能残留液体
• 不同样品之间可能发生交叉污染
• 化学或生物残留物可能影响准确性

正确做法：

• 每次使用后务必丢弃
• 生物实验应使用无菌移液管

吸液过快（产生气泡）

吸液过快会引入气泡，影响测量精度和液体稳定性。.

详细说明：

• 气泡会降低体积准确性
• 分液时液体可能飞溅
• 液滴形成不一致

正确做法：

• 缓慢按压吸球
• 平稳、逐渐地释放压力

使用与溶剂不兼容的塑料移液管

某些塑料移液管不耐受有机溶剂，如丙酮、乙醇或氯仿。.

详细说明：

• 移液管可能变形或软化
• 可能发生化学品泄漏
• 可能造成样品污染

正确做法：

• 强溶剂应使用玻璃移液管
• 务必检查化学兼容性

玻璃移液管清洁不当

玻璃移液管可重复使用，但清洁不当会导致残留物和实验误差。.

详细说明：

• 化学残留物可能与新样品发生反应
• 生物污染风险增加
• 结果变得不可靠

正确做法：

• 使用后立即清洁
• 使用适当的清洁溶液
• 必要时进行灭菌

接触表面导致污染

接触工作台、手套或容器壁等表面会引入污染。.

详细说明：

• 实验无菌性丧失
• 外来颗粒进入样品
• 数据准确性受影响

正确做法：

• 保持移液管尖端位于液面以上
• 避免接触容器壁

提高移液操作技巧的建议

务必缓慢移液

缓慢且受控的移液是实验室液体处理中最重要的技术之一。快速操作常会引入气泡、引起飞溅并降低测量精度。缓慢移液可提高重复性并确保液体转移顺畅。.

详细步骤：

• 将移液管插入液体前，轻轻挤压橡胶吸球
• 缓慢释放压力，使液体逐渐上升进入移液管
• 仔细观察液面，避免过度吸液
• 在整个转移过程中保持一致、稳定的速度
• 分液时缓慢释放液体，避免飞溅或产生气泡
• 处理敏感样品（如细胞培养物或试剂）时，进一步降低速度以获得更高精度

主要优势：

• 减少气泡形成
• 提高测量精度
• 防止样品损失和飞溅
• 增强微量操作中的控制能力

保持移液管垂直

保持移液管处于垂直位置对于精确吸取液体和控制分液至关重要。任何偏离垂直方向的行为都会影响体积一致性，并增加泄漏或不准确取样的风险。.

详细步骤：

• 在吸取液体时，使移液管与液面保持垂直（90°）
• 确保吸头完全浸入液体中，但不要接触容器底部
• 吸取液体时避免倾斜移液管
• 仅在伸入狭窄或难以触及的容器时允许轻微倾斜角度
• 保持手腕稳定，以确保在整个操作过程中维持对齐
• 在分液前重新检查垂直位置

主要优势：

• 确保一致的体积吸取
• 降低泄漏风险
• 提高可重复性
• 防止来自容器壁的意外污染

避免接触容器壁

移液过程中接触容器壁可能导致污染、样品损失以及转移结果不一致。保持清洁且居中的液体路径对于高质量实验室工作至关重要。.

详细步骤：

• 将移液管吸头保持在液柱中心
• 避免刮擦或接触试管或烧杯的侧壁
• 小心插入移液管，以尽量减少对液面的扰动
• 在分液时，尽可能将吸头保持在液面稍上方
• 平稳移动，避免在容器内突然改变方向
• 对于无菌操作，确保吸头绝不接触非无菌表面

主要优势：

• 防止交叉污染
• 保持样品纯度
• 提高转移的准确性
• 减少样品间的残留

使用正确规格的移液管

使用正确规格的移液管对于实现精确的体积控制至关重要。规格过大或过小的移液管可能导致测量误差、溢出或取样效率低下。.

详细步骤：

• 在开始操作前确认所需液体体积
• 对于小体积（逐滴或微量操作），选择细尖移液管
• 对于中等体积转移，使用标准移液管
• 对于大体积，如需精确测量，则使用刻度移液管
• 避免移液管容量过满或未充分利用
• 始终根据实验要求（化学、生物学或临床用途）匹配移液管类型

主要优势：

• 提高体积准确性
• 防止溢出或取样不足
• 增强实验可靠性
• 优化工作流程效率

练习稳定的手部控制

稳定的手部控制对于精确的液体处理至关重要，尤其是在逐滴添加或敏感实验（如酶反应或细胞培养）中。.

详细步骤：

• 将肘部支撑在实验台上以获得更好的稳定性
• 以放松但牢固的握持方式握住移液管
• 练习缓慢且轻柔地挤压胶头
• 在处理实际样品前，先用水进行模拟移液操作
• 训练一致的手部动作以减少抖动
• 专注于平稳动作而非速度

主要优势：

• 提高滴液准确性
• 减少手部疲劳
• 增强敏感实验中的精确度
• 增加常规实验室工作中的信心

总结

正确使用巴斯德移液管对于获得可靠的实验结果至关重要。了解塑料与玻璃移液管之间的差异，有助于用户根据应用选择合适的工具。通过遵循正确的操作技术和安全指南，实验室工作可以更加高效、准确和安全。.